Kategorie: Nádorová biologie/imunologie/genetika a buněčná terapie
Téma: MOLEKULOVÁ PATOLÓGIA NÁDOROVÝCH OCHORENÍ I.
Číslo abstraktu: 016
Autoři: doc. RNDr. Jozef Hatok, Ph.D.; Ing. Andrea Štefaniková, PhD. ; RNDr. Veronika Čapláková; MUDr. Erik Kúdela, Ph.D.; MUDr. Tomáš Balhárek, Ph.D.
Úvod: Endometriálna sliznica je fyziologicky pravidelne vystavovaná nadmernej estrogénovej stimulácii, čím dochádza k proliferačným a hyperplastickým zmenám. Kým simplexná hyperplázia a komplexná hyperplázia (adenomatózna bez atypií) veľmi zriedkavo progredujú do karcinómu, adenomatózna hyperplázia endometria s atypiami je prekurzorom endometriálneho karcinómu (ECa). Okrem pôsobenia estrogénov na endometrium (END), zohráva dôležitú úlohu aj apoptóza, ktorá kontroluje bunkovú homeostázu počas menštruačných cyklov. Samotná apoptóza je regulovaná viacerými génmi, špeciálne však Bcl-2 génovou rodinou, avšak ich úloha pri ECa nie je presne definovaná. Preto sme sa v našej štúdii zamerali na profilovanie apoptotických génov na rozdielnych skupinách endometriálnych biopsií.
Materiál a metódy: Vytvorili sme tri rôzne skupiny vzoriek: i) kontrolná_1 (proliferačné END, n = 14); ii) kontrolná_2 (sekrečné END, n = 2); iii) karcinómová (endometriálny adeno- Ca endometroidného typu, n = 29). Po izolácii celkovej RNA z bioptických vzoriek sme vykonali reverznú transkripciu a následnú cDNA použili na kvantitatívnu analýzu pomocou real-time PCR v mikrofluidnom formáte. Samotnou array (Applied Biosystems TaqMan Human Apoptosis Array) dokážeme stanoviť 93 génov pre jednu vzorku.
Výsledky: Na základe určenia absolútnych hladín expresie mRNA pre apoptotické proteíny sme pri korelácii dvoch skupín považovali za významné zmeny v hodnotách nad 2 (nadregulované) alebo pod-2 (podregulované). Medzi karcinómovou skupinou a kontrolami sme detegovali 8 génov s nadexpresiou, z toho bola polovica Bcl-2 rodiny (Bcl-2L14, Bcl-2A1, BIK, Bcl-2L11). Podobné výsledky sme zaznamenali, aj keď sme ako kontroly použili iba proliferačné END. Pri sekrečnom endometriu sme okrem 6 nadexprimovaných génov zaznamenali aj 4 podexprimované (BIRC3, BIRC7, FASLG a Bcl-2L10). Naopak, pri korelácii sekrečného END oproti proliferačnému poukazujeme až na 42 deregulovaných génov.
Záver: Zdá sa, že molekulárne zmeny génov vnútornej aj vonkajšej apoptotickej dráhy zohrávajú dôležitú úlohu pri cyklickom formovaní endometriálneho tkaniva. Ich význam v spojení s rozvojom karcinómového diferencovania sme detegovali na minimálnej úrovni. Dôležitá však bude analýza samotných proteínov pomocou imunohistochemickej a Western blotovej metódy.
Táto práca bola podporená projektom APVV-0224-12 a projektom „Zvýšenie možností kariérneho rastu vo výskume a vývoji v oblasti lekárskych vied", ITMS kód projektu: 26110230067 spolufinancovaným zo zdrojov EÚ a Európskeho sociálneho fondu
Datum přednesení příspěvku: 4. 6. 2016