Konference: 2013 XXXVII. Brněnské onkologické dny a XXVII. Konference pro nelékařské zdravotnické pracovníky
Kategorie: Onkologická diagnostika
Téma: XXVII. Základní a aplikovaný výzkum v onkologii
Číslo abstraktu: 280
Autoři: Mgr. Markéta Komínková; Ing. Iva Blažková; Mgr. Natalia Vladimirovna Cernei; Mgr. Ondřej Zítka; doc., RNDr. Michal Masařík, Ph.D.; prof. RNDr. Marie Stiborová, DrSc.; prof. MUDr. Tomáš Eckschlager, CSc.; Mgr. Markéta Vaculovičová (Ryvolová), Ph.D.; doc.RNDr. Vojtěch Adam, Ph.D.; doc.Ing. Jaromír Hubálek, Ph.D.; doc.Ing. René Kizek, Ph.D.
Východiska:
Využití doxorubicinu je limitováno z důvodu jeho vysoké kardiotoxicity, kdy může docházet až k srdečnímu selhání. Mechanizmus nežádoucích účinků funguje pravděpodobně na bázi vyvolání oxidativního stresu v kardiomyocytech a následném rozvrácení enzymatického systému mitochondrií, které způsobuje jejich dysfunkci. Cílem této práce bylo využít jednoduchou moderní analytickou metodu pro sledování hladiny doxorubicinu v extraktech připravených z potkaního srdce jako základní metodický přístup pro hodnocení kardiotoxicity.
Materiál a metody:
Jako experimentální model byl použit potkan out-bredního kmene Wistar albino z konvenčního chovu LF Masarykovy univerzity v Brně, do nějž byl in vivo aplikován DOXO. Po jeho usmrcení byly vyjmuty orgány a pořízeny snímky jejich fluorescence. Ze srdce byl poté připraven extrakt a podroben HPLC analýze.
Výsledky:
DOXO vykazuje silnou fluorescenci, což lze pozorovat na obr. 1 nejvíce u srdce, jater a částečně slezíny. Ledviny vykazovaly fluorescenci nižší. Výsledky HPLC analýzy srdečního extraktu vykazovaly značný rozdíl mezi píkem samotného DOXO a píkem srdce potkana po aplikaci DOXO. Pozorovali jsme signifikantní snížení koncentrace doxorubicinu, a to přibližně o 80 °%, což lze přisoudit změně redoxního stavu DOXO.
Závěr:
Podařilo se nám navrhnout vhodnou metodu pro kvantifikaci doxorubicinu ve vzorcích srdeční tkáně potkana. V rámci této studie jsme potvrdili, že po aplikaci DOXO ke vzorku potkaního srdce dochází k jeho chemickým změnám, které mají za následek úbytek koncentrace původně aplikovaného DOXO vlivem přeměny na chemicky odlišné sloučeniny. Tyto předběžně získané výsledky poskytují předpoklad, že budeme v budoucnu schopni v navazujících experimentech pomocí těchto dvou metod sledovat postup chemické změny DOXO v kombinaci s in vivo fluorescenčním zobrazením přímo v laboratorním zvířeti.
Práce byla finančně podpořena projekty MSMT 6215712402 a CYTORES GA ČR P301/10/0356 a NANOLABSYS CZ.1.07/2.3.00/20.0148.
Datum přednesení příspěvku: 18. 4. 2013
